儿童HLADRB1、DQB1位点基因多态性分析

【关键词】 白族

　　主要组织相容性复合体(mhc)是染色体上的一群紧密连锁的基因群，可作为一个遗传单位/单倍型而遗传，属共显性等位基因［1］。人类的mhc称人类白细胞抗原(hla)系统,位于人的第6对染色体短臂上。hladr、dq抗原是异基因移植免疫反应中最重要的抗原之一，决定其特异性的主要编码基因drb1、dqb1具有高度多态性，其对hla与疾病相关性及人类遗传学等研究均具有重要意义［2］。近年来，国外已经对不同人种和民族的hla分布情况作了大量的调查研究，我国对不同地区汉族群体hla遗传学的研究也在不断地深入，同时对少数民族的hla dna多态性的研究报道也逐渐增多，但尚未见昆明地区白族hladrb1、dqb1等位基因多态性研究报道［312］。本研究应用pcrssp技术对昆明地区70名白族儿童hladrb1、dqb1等位基因进行检测分析，旨在探讨昆明白族人群hladrb1、dqb1等位基因频率分布，从而提供遗传学方面的数据。

　　1 材料与方法

　　1.1 样本来源

　　2003年7月于昆明市某民族小学，抽取无血缘关系的70名年龄在6～12岁的白族儿童为研究对象，每人抽取静脉血2 ml，edta抗凝初步处理后置于-70℃冰箱保存，男女比为1∶1。

　　1.2 实验方法

　　1.2.1 基因组dna制备

　　采用血液基因组dna提取试剂盒（美国promega公司生产，批号：204337)在常温下快速提取儿童血液基因组dna。Www.lw881.com

　　1.2.2 hladrb1、dqb1位点基因分型

　　采用dna分型试剂盒（美国pelfreeze clinical systems公司） (pcrssp)扩增hladrb1、dqb1 dna片段，pcr反应体系、循环条件、操作方法及结果读判均按所附说明，读板纸为该试剂盒所附。

　　1.3 统计分析

　　用直接计算法统计hladrb1、dqb1各等位基因的基因频率,样本分布经hardyweinberg平衡检验。

　　2 结果

在本研究中，70名昆明白族儿童hladrb1位点上共检出等位基因15个，见表1，其中drb1*0801及*0401、*1201基因频率最高，分别为20.7%、16.4%，而drb1*0101、*0103、*0307、*1001基因频率最低，各自仅占0.7%。表1 昆明白族儿童 hladrb1等位基因的频率分布（略）

dqb1位点共检出等位基因7个，见表2，其等位基因频率由高到低依次为dqb1*0301、dqb1*06、dqb1*05、dqb1*04、dqb1*0303、dqb1*0302、dqb1*0201，其中dqb1*0301、*0601基因频率最高，分别为23%、21%，而*0201/02、*0302基因频率最低，各自占4%、6.4%。表2 昆明白族儿童hladqb1等位基因的频率分布（略）

　　3 讨论

白族是56个民族中历史较悠久的少数民族之一， 历史上白族经历了复杂的民族融合、变迁，它源于古代的氐羌族群的一支分支，在唐宋时期白族才逐渐形成。它有自己的语言，属汉藏语系藏缅语族白语支。汉晋时期的棘人是白族的直接祖源，唐宋时期的白蛮是其前身。唐宋是白族形成的重要时期，这个期间白族与中原地区互通有无，交往密切，在许多方面受到了汉族的影响，促进了本民族的发展，还同化了一部分迁移来的汉族。

　　3.1 昆明白族儿童hladrb1基因频率与其它少数民族的比较

　　首次对昆明白族儿童hladrb1等位基因分型，观察到昆明白族人群在hladrb1位点上共检出15种等位基因，最常见的等位基因是*0801，高频等位基因是*0401、*1201、*0901，这几种等位基因共占可检出等位基因的62.8%，而*0101、*0103、*1001等位基因较少见；与其它民族比较，壮族中最常见的等位基因为*1501，高频等位基因是*1601、*1401、*0901，低频等位基因是*0701、*1306、*0801，这几种等位基因共占可检出等位基因的59.5%［11］；纳西族中最常见的等位基因为*1201，高频等位基因是*0803、*0901、*1404，低频等位基因是*0305、*0438、*1123，这几种等位基因共占可检出等位基因的50.3%［7］。可以看出各少数民族hladrb1基因位点分布存在一定的共同点，但也存在一定的差异性，表现各自独特的hla遗传特征。

　　3.2 昆明白族儿童hladqb1基因频率与其它少数民族的比较

　　昆明白族hladqb1基因位点上共检出7种等位基因，白族最常见的等位基因是*0301，高频等位基因是*0601、*0501的基因频率较高，而*0201、*0302、*0401等位基因较少见；纳西族中最常见的等位基因为*0301，高频等位基因是*0502、*0503、*1404［7］；京族中最常见的等位基因为*0301，高频等位基因是*0502、*0201、*0501［12］。可以看出*0301是各少数民族的最常见的等位基因，其它基因上分布顺序也存在差异性。

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